电子竞猜平台,英雄联盟竞猜app

瑞鼎生物熱線0536-2269960
聯系我們
服務熱線
0536-2269960
總部地址: 濰坊市綜合保稅區辦公樓408室
LCL161可縮小腫瘤
瀏覽: 發布日期:2019-10-28
梅奧診所研究人員發現,多發性骨髓瘤新藥LCL161可刺激人體免疫系統,導致多發性骨髓瘤患者的腫瘤縮小。這些研究結果發表在《自然·醫學》雜志上。  多發性骨髓瘤是一種血液癌,它能影響血液的白細胞和血漿細胞,正常情況下兩種細胞都能產生抗體,可以抵抗感染。癌細胞在生長時不會產生有用的抗體,而是分泌大量單一抗體,積累在體內導致腎臟病變和感染。  在這項研究中,研究25位多發性骨髓瘤患者的主要研究員,同時也是梅奧診所生物化學家的瑪爾塔•凱西博士說:“LCL161藥物最初被開發是用于促進腫瘤死亡。然而,我們發現藥物不能直接殺死腫瘤細胞,而是使免疫系統更加突出,然后免疫系統將腫瘤細胞識別為外來入侵者并消除它們。梅奧診所的研究人員將結合免疫檢測點抑制劑對LCL161藥物進行后續臨床試驗,已經廣泛地應用于許多腫瘤治療中,用來評估LCL161是否能代替新治療選擇。  凱西博士說:“臨床前的研究模型是在十年前發展起來的,主要是為了精確地預測哪一種藥物能夠應用到臨床治療,而且還能幫助多發性骨髓瘤患者考慮哪些實驗治療劑是最好的。這項研究強調了研究藥物對在培養板上的腫瘤細胞的影響重要性,而且還研究了腫瘤細胞與自身微環境的相互作用的重要性,研究發現表明LCL161藥物對多發性骨髓有活性抑制,而且類似的藥物比之前的藥物可能具有更廣泛的臨床活性。
LCL161的生物活性      體外      LCL161 以劑量依賴性方式顯示Hep3B(IC 50 =10.23μM)和PLC5(IC 50 =19.19μM)細胞中的抗增殖作用并顯著降低細胞活力。LCL161以劑量依賴性方式在兩種敏感細胞系中顯著誘導凋亡。從非常低的濃度開始,LCL161顯著下調cIAP1的表達。低濃度的LCL161在濃度為0.5 nM時開始抑制cIAP1 [2]。LCL161是一種小分子口服IAP拮抗劑,用于與細胞毒性劑聯合使用。在體外研究了LCL161對CYP3A4 / 5(CYP3A)活性的影響。人肝微粒體的結果表明,LCL161以濃度和時間依賴性方式抑制CYP3A(K I為0.797μM,K inact為0.0803min -1)。LCL161在報告基因測定中激活人PXR并在人肝細胞中誘導CYP3A4 mRNA高達~5倍。      在體內      攜帶腫瘤的小鼠用載體或LCL161 po以50mg / kg /天的劑量或SC-2001 po以10mg / kg /天的劑量,每周5天,或組合持續治療,持續時間為50mg / kg /天。研究。通過與SC2001和LCL161共同處理顯著抑制腫瘤生長,并且在研究結束時,共處理組中的腫瘤大小僅為對照組的三分之一。LCL161是一流的口服Smac模擬物,顯示在小鼠異種移植模型中誘導cIAP1的降解和胱天蛋白酶3的裂解      LCL161的實驗參考方法      激酶測定      使用探針反應,咪達唑侖-1'-羥基化和睪酮6β-羥基化來評估CYP3A活性。對于可逆抑制,孵育(37°C,10分鐘)由(最終濃度)組成:磷酸鉀緩沖液(100 mM,pH 7.4),β-NADPH(1 mM),氯化鎂(5 mM),微粒體蛋白( 0.025 mg / mL),探針底物(1μM咪達唑侖或25μM睪酮),LCL161(0,0.5,1,5,10,25,50或100μM)和有機溶劑(0.2%乙腈用于咪達唑侖,0.2%甲醇用于睪酮)。預孵育3分鐘后,通過加入β-NADPH引發反應,并通過加入乙腈(兩個體積)終止反應。先前顯示反應與時間和蛋白質濃度呈線性關系(結果未顯示),咪達唑侖和睪酮轉換分別為8.7±1.3%(n = 3)和2.6±0.20%      MCE尚未獨立確認這些方法的準確性。它們僅供參考。      細胞分析      將細胞(3×10 4活細胞/孔)鋪板于96孔透明底白板中,并將板在37(5%CO 2)下孵育~24小時。/ 95%空氣)在加濕培養箱中。然后用各種濃度(0.5,1,2.5,5,10,25或50μM)的LCL161,陽性對照,利福平(RIF)或媒介物對照(0.1%DMSO)處理細胞(6個重復孔)。 Puracyp劑量培養基中24小時的最終濃度。孵育期后,用PBS洗滌細胞,裂解并根據供應商的說明添加熒光素酶底物。將每個孔的等分試樣轉移到黑色96孔板的相同孔中。用TopCount NXT微孔板閃爍和發光計數器測量每個孔的發光。細胞活力是通過使用CellTiter-GLO細胞的ATP含量測量經過相同處理的PXR -報道基因測定板分離板測量?發光細胞活力檢測試劑盒。所有治療的細胞活力> 80%      MCE尚未獨立確認這些方法的準確性。它們僅供參考。      動物管理局      小鼠使用      雄性NCr無胸腺裸鼠(5-7周齡)。將每只小鼠皮下接種于背側,將1×10 6個 Huh-7細胞懸浮于0.1mL含有50%基質膠的無血清培養基中。當腫瘤達到200-300mm 3時,小鼠每天一次接受LCL161(50mg / kg)或SC-2001(10mg / kg)po,或LCL161和SC-2001的組合。控制接收車輛。使用卡尺每周測量腫瘤,并使用以下標準公式計算它們的體積:寬度2 ×長度×0.52。LCL161是一流的口服Smac模擬物,顯示在小鼠異種移植模型中誘導cIAP1的降解和胱天蛋白酶3的切割。      大鼠      LCL161口服給藥,每周一次,每次21天,起始劑量為10mg(通過使用在10%大鼠中引起嚴重毒性的十分之一劑量并轉化為人等效劑量計算)。在MDA-MB-231三陰性乳腺癌異種移植模型中,每周一次和每日兩次LCL161給藥同樣有效。每周一次耐受性更好,體重減輕。